近日，中国生物新突发传染病新型疫苗研发全国重点实验室病毒载体和重组病毒技术研究团队在国际著名病毒学期刊《Journal of Virology》和《Journal of Virological Methods》发表了创新高效和精准重组病毒疫苗构建和筛选方法等系列研究成果，丰富了新突发传染病疫苗研发技术路径，开发了新一代猴痘减毒活疫苗。

研究团队创新运用CRISPR-Cas基因编辑技术，对我国传统“功勋毒株”痘苗病毒天坛株（Vaccinia Virus Tiantan，VTT）进行精准改造。研究结果表明，引入CRISPR-Cas基因编辑技术对病毒基因组多点位、定向精准编辑，规避了既往同源重组技术整合效率低、毒株获取慢的技术缺点。

应用CRISPR-Cas基因编辑技术，研究团队敲除了VTT基因组中与毒力、宿主范围及免疫调节相关的多个基因片段（包括C12L-K2L及A45R等）。研究结果证明，构建的新型减毒株rVTTΔC12K2ΔA45能诱导出针对猴痘病毒（MPXV）在动物攻毒保护实验中表现出显著保护效力，为开发新一代猴痘病毒疫苗提供技术支撑。

研究团队建立基于实时动态监测病毒单克隆筛选方法，结合实时活细胞成像分析技术，高通量实时监控细胞病变效应形成过程的明场与荧光双通道信号，精准识别并分离出无母本污染、表型均一的纯重组克隆，加速筛选进程。从多个候选克隆中筛选出遗传稳定、均一性好的候选疫苗株。

新突发传染病新型疫苗研发全国重点实验室长期致力于新突发传染病疫苗研发技术创新。该系列研究成果已经应用于DNA病毒类载体和重组病毒构建，是重组病毒载体技术平台的标志性成果之一，除此之外，团队还搭建基于反向遗传学技术的RNA病毒类载体和重组病毒构建，构建成功麻疹病毒、水泡口炎病毒等病毒载体，未来将服务于新突发传染病疫苗研发，为我国生物安全保障提供技术支撑。

来源：新突发传染病新型疫苗研发全国重点实验室